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原理
膜脂主要包括磷脂和糖脂。样品经高温处理以除去水分并使脂酶钝化，用氯仿-甲醇溶液研磨抽提总脂，再用石油醚反复冲洗去除中性脂，得到膜的极性脂，碱性条件下膜脂与甲醇反应产生高级脂肪酸甲酯。
获得的高级脂肪酸甲酯注入气相色谱柱，通过汽化室汽化后被载气带入分离柱，根据各组分在分离柱中保留时间不同而被分离。用标准脂肪酸的保留时间（所谓的保留时间Rt:理论上是指样品在分离柱中运行所用的时间，实际中是以加样为起始零时间，物质到达检测器达到浓度最大时为终止时间，从起始零时间到终止时间为保留时间）定性各组分。用面积归一法（所谓面积归一法是将各组分色谱峰的总面积之和视100,各组分的峰面积在其中所占的百分比为各组分的相对值的定量方法）定量计算各种
脂肪酸
含量。仪器设备
（
1）气相色谱仪 （2） 色谱工作站或积分仪
（
3）LKB油脂快速提取仪 （4） 烘箱
（
5）分液漏斗 （6）1mL移液管
（
7）10mL带塞刻度试管 （8）60目的筛
（
9）100 mL量筒
试剂
(1).氯仿-甲醇溶液1：2（体积比） (2).氯仿
(3).0.76%NaCl溶液 (4)甲醇饱和的石油醚溶液
(5).石油醚-苯溶液：将一份石油醚（30-60℃沸程）与等体积的苯混合（体积比）即可。
(6).0.4 mol·L-1 KOH-甲醇溶液：称取22.4g KOH溶于甲醇中，并定容至1000mL。
(7).无水乙醇。
(8).脂肪酸标样：棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸和花生酸等。
方法步骤
1.总脂的抽提
(1).取适量植物样品，100℃烘3060 min,以便除去水分和钝化脂酶。取出样品冷却至室温，粉碎后过60目的筛，称过筛后的样品5g放入滤纸筒.在上面覆盖一层脱脂棉，装入LKB油脂快速提取仪的样品室，浸泡于约60 mL氯仿-甲醇提取液中，开循环冷却水室温过夜或 10h。
(2).打开加热开关并调节温度旋钮，使提取液处于微沸状态，维持1 h后关闭加热开关。
(3).打开提取仪样品室的旋钮，使提取液流入蒸馏瓶（预先加几粒玻璃珠）,打开回流加热开关.调节温度调节旋钮，蒸馏蒸馏瓶中的提取液，并使冷却后的液体流过样品室再回到蒸馏瓶中，如此回流提取1 h,关闭加热开关。目的是淸洗样品室壁和滤纸筒中黏附的残留脂。
(4).关闭提取仪旋钮，取出滤纸筒。
(5).打开回流加热开关，再将蒸馏瓶中的样品蒸发至只含少量提取液，关闭加热开关。
(6).再将蒸馏瓶取下于100℃烘烤1 h,烘干提取液获得总脂。
2.膜脂的抽提
将获得的总脂溶于甲醇饱和的石油醚溶液中，充分振荡，静置分层后，回收下层甲醇溶液。如此重复
23次，最后浓缩甲醇溶液获得膜脂。
3.膜脂脂肪酸的甲酯化
(1).取膜脂0.1 mg于10 mL 具塞试管中，加1mL石油醚-苯混合液使之溶解，再加 0.4 molL-1 KOH-甲醇溶液1mL, 充分振荡后室溫反应2060 min(夏季20 min,冬季 60 min) 。
(2).加入蒸馏水使上层有机相至约10 mL刻度处，再充分混匀后静置，直至溶液分为清晰可辨的上下两层。
(3).如果有机相混浊，加入23滴无水乙醇，静置片刻，待用。
4. 称取标样 各 0. 1 mg,分别溶于1mL 的苯：石油醚=1 : 1(体积比）中，0.4molL -1 KOH-甲醇溶液甲基化30 min.重复3（2）3(3)步骤
5.仪器条件
(1).柱型：6%10%DEGS(聚二乙二醇丁二酸酯),101白色硅烷化担体(酸洗）。
(2).温度：液化室250 ℃，柱温195℃,检测器250℃。
(3).气体流速：载气（N2
）流速，
30 mLmin-1
；
H2 流速，40 mLmin-1;
空气流速，
30 mLmin-1.
(4).信号调节：1×102
或
1×10.。
6.进样
(1).用微量进样器吸取标样上层有机相各1μL进样，同时启动色谱工作站记录色谱峰和相关数据（主要为Rt和峰面积），记为Rt0.
(2).用微量进样器吸取样品1μL进样，同时启动色谱工作站记录色谱峰和相关数据，记为Rtx
。
7.结果计算
(1).定性（标准物质定性法）：通过样品与标准的保留时间和峰面积进行比较，确定样品中HFA（高级脂肪酸）的类型。当样品中某峰的Rtx
与
Rt0
相同，则样品中此峰便与
Rt0
所对应的
HFA为同一HFA。
(2).定量（面积归一法）。
式中，
Pi
：某脂肪酸的百分含量；
A1
、
A2
、
A3···An
：各脂肪酸的峰面积；
Ai
：被测脂肪酸的峰面积。可以由色谱工作站或积分仪自动给出。
注意事项
(1).步骤1（1）将过筛后的样品放入滤纸筒后，在上面一定要覆盖一层脱脂棉，但不能太厚。。
(2).步骤1（2）打开加热开关注意调节温度旋钮，一定要使提取液保持微沸状态，切忌温度不能太高。
(3).保证被分析的样品清亮。
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